إنتاج للفيروسات الممرضة للحشرات وكلونتها في خط انتاج مكلون لمزارع خلوية أولية مختارة من أنسجة دودة ورق القطن

• د. اميمة خميس
• معهد الهندسة الوراثية والتكنولوجيا الحيوية، جامعة المنوفية، مدينة السادات، المنوفية، مصر.

الملخص

تم الحصول على اكثار كامل لفيروس الجرانيولوس والبوليهيدروسي النووي المتخصص على دودة ورق القطن Spodoptera littoralis وفيروس الجرانيولوسي المتخصص لفراشات درنات البطاطس من مزارع الخلاياالأولية التى تم انشائها ثم اكثارها وكلونتها لعدة أجيال فى مركز الفيروسات بقسم الحشرات الأقتصادية و المبيدات بكلية الزراعة- جامعة القاهرة، وتم اكثار الفيروسات الثلاثة بكل من العدوى الفيروسية والعدوى بالحامض النووي وذلك في مزرعة خلايا دودة ورق القطن رقم 96 والتي تم الحصول عليها من خلايا المبيض. تكاثرت فيروسات SpliGV, PhopGV SpliNPV بشكل معنوي خلال عدة تمريرات خلوية في مزارع الخلايا S196 على درجة حرارة 19 .تم عدوى الخلايا وحفظها على درجة 19 م خلال خلال الساعات الأربعة الأولى ، ثم تم تحضين جميع الخلايا الملقحة على درجة حرارة 27?م وحتى نهاية التجربة (20 يوم). وقد وجد أن التضاعف الفيروسي قد تم بنفس المعدل. وبمقارنة النسل الناتج عن SpliGV والتي تكاثرت في مزارع الخلايا أو في العائل ، وذلك بإستخدام الميكروسكوب الإلكتروني و صورة الفيروس على الهلام (الجيل) باستخدام إنزيمات القطع المتخصصة ، فأدى ذلك الى تحديد هويتهم. كما تم التعرف على العدوى الفيروسية بواسطة مجسات(probes) نووية متخصصة.